气相色谱仪测定肉制品中吡菌磷残留量的方法

一、气相色谱仪测量肉食品中吡菌磷残余量的方式基本原理：

试件用环己烷-乙酸乙酯（1＋1，容积比）匀质获取，萃取液用凝胶渗透色谱净化处理，萃取、滴定剂后用气相色谱仪测量，外标法定量分析。

1、疑胶净化处理萃取液：

环己烷-乙酸乙酯混和有机溶剂（1＋1，容积比）：取 100 mL 环己烷，添加 100 mL 乙酸乙酯，混匀预留。

2、标准物质：吡菌磷国家标准物质：纯净度≥97%。

3、标液配置：

1）吡菌磷规范贮备饱和溶液：精确称取适量的吡菌磷国家标准物质（精准至 0.1 mg），用二甲苯配出浓度值约为 1.0 mg/mL 的规范储备液。

2）吡菌磷规范工作中饱和溶液：依据监测规定，各自汲取以上规范贮备液用正己烷稀释液成适度浓度值的规范工作中饱和溶液

1、气相色谱仪：装有火苗亮度探测器（FPD），带磷滤色片。

2、凝胶渗透色谱仪。

3、电子分析天平：感量 0.01 g 和 0.0001 g。

4、离心脱水机。

5、旋转蒸发器。

6、氢气烘干仪。

7、均质器。

1、获取：

称量10 g试件（精准至0.01 g）于盛满20 g无水硫酸钠的100 mL试管架中，添加30 mL环己烷-乙酸乙酯混和有机溶剂，用均质器在15 000 r/min匀质获取1.5 min后，在3 000 r/min离心式3 min。上清液根据配有无水硫酸钠的筒形布氏漏斗，搜集于100 mL梨型瓶中。沉渣用30 mL环己烷-乙酸乙酯混和有机溶剂跟上面一样获取实际操作，合拼2次萃取液，用少许的环己烷-乙酸乙酯混和有机溶剂清洗无水硫酸钠柱。将萃取液于40℃沙浴旋 转挥发至约2 mL，待净化处理。

2、凝胶色谱净化：

1）凝胶渗透色谱仪的色谱仪标准：

a）净化处理柱：400 mm×25 mm，内装 BIO-Beads S-X3 填充料或非常者。

b）流动性相：环己烷-乙酸乙酯（1＋1，容积比）。

c）流动速度：5 mL/min。

d）进样量：5 mL。

e）逐渐搜集时间：1 200 s。

f）完毕搜集时间：1 800 s。

2）净化处理流程：

将萃取的萃取液迁移至10 mL标尺离心式试管婴儿中，并且用环己烷-乙酸乙酯混和有机溶剂多次清洗梨型瓶，合拼洗剂并滴定剂至标尺。在4 000 r/min离心式5 min后，将上清液用0.45 μm有机相滤纸滤入凝胶渗透色谱仪气相瓶中。用凝胶渗透色谱仪净化处理，搜集1 200 s～1 800 s的排出液。将流出液用氢气烘干仪吹干，添加1.0 mL正己烷融解，搅拌，供气相色谱仪测量。

3、气相色谱仪测定：

1）气相色谱仪的色谱仪标准：

a）色谱柱：HP-5，30 m×0.32 mm（i.d.），膜厚 0.25 μm，或非常者。

b）色谱柱温度：原始温度 220℃，维持 10 min；以 10℃/min 的速度升到 250℃，维持 7 min。

c）载气（N2）：1.5 mL/min。

d）氡气（H2）：75 mL/min。

e）气体：100 mL/min。

f）探测器温度：280℃。

g）气相口温度：250℃。

h）进样容积：1 µL。

i）气相方法：无分离气相，1.5 min 后开启分离阀。

2）色谱仪测量：

依据试件中吡菌磷的成分，选择适合含量的规范工作中饱和溶液与被测样液等容积气相。规范磨削液和被测样液中吡菌磷的响应值应在仪器设备回应线形范畴内。在以上色谱仪标准下，吡菌磷的保存期约为14.9 min，依据峰总面积外标法定量分析。